Domuz Gribi Laboratuar Tanısı

Swine İnfluenza A (H1N1) Laboratuar Algoritması

İnfluenza benzeri hastalık şüphesi olan hastalardan örnek alınması ve viroloji laboratuarına gönderilmesi mevsimsel İnfluenza sürveyansında olduğu gibi gerçekleştirilir.
Nazofaringeal veya nazal/boğaz sürüntü örnekleri laboratuarımızca sağlanan eküvyon çubukları yardımı ile alınıp viral transport vasatı içerisine konularak bekletilmeden uygun taşıyıcı kap içerisinde, soğuk zincir ve biyogüvenlik kurallarına uygun ve hızlı bir şekilde laboratuara ulaştırılmalıdır.
Ulusal İnfluenza Merkezi hasta bilgi formu eksiksiz olarak doldurulmalı, ayrıca yurt dışı seyahat öyküsü sorgulanıp formun alt kısmına nereye olduğu not alınmalı ve form hasta örnekleri ile beraber gönderilmelidir.
Laboratuara gelen örnekler uygun hazırlık işlemlerinden sonra İnfluenza virüsünün konservatif gen bölgesi hedef alınarak gerçekleştirilen ve İnfluenza A / İnfluenza B virüslerini tespit etmeye yönelik Polimeraz Zincir Reaksiyonu (PCR) ile test edilmektedir.
İnfluenza A virüsü tespit edilen örneklerde mevcut alt tipi belirlemeye yönelik H1,H3 ve H5 primerleri kullanılarak ikinci bir PCR reaksiyonu gerçekleştirilmekte ve İnfluenza A virüsünün alt tipi tespit edilmektedir.
Yeni identifiye edilen ve “Swine İnfluenza virüs A/California/04/2009 A(H1N1)” olarak adlandırılan virüsün tam genom sekansı referans alınarak gelen örneklerin sekanslaşması suretiyle virüsün tiplendirilmesi ve genetik karakterizasyonu yoluna gidilecektir.
Ayrıca şüpheli örnekler, eş zamanlı olarak Dünya Sağlık Örgütü (DSÖ) Destek laboratuarlarına ileri tanı ve karakterizasyon amacıyla gönderilecektir.

Tanıda kullanılabilecek laboratuar testleri:

İnfluenza A virüslerini tespit etmeye yönelik hızlı antijen testleri Swine virüsü tespit edebilmekle birlikte söz konusu testlerin duyarlılıkları düşüktür ve yanlış negatif sonuç verebilir. Ayrıca mevsimsel İnfluenza A ile Swine İnfluenza ayrımı yapılamadığından ileri tetkiklere ihtiyaç duyulur.
PCR testleri ile mevcut primerler kullanılarak İnfluenza A virüsünün varlığı tespit edilebilmekte ancak Swine İnfluenza H1N1 alt tiplendirmesi yapılamamaktadır.
Swine İnfluenza A/H1N1’i doğrulamak için virüs izolasyonu (Biyogüvenlik düzeyi 3’de) ve en azından genomun kısmi sekanslaşması yapılmalıdır.
Laboratuar biyogüvenlik önlemleri pandemik İnfluenza virüs suşuna uygun olarak ilgili kılavuzlarda belirtildiği şekilde uygulanmalıdır.
DSÖ, “Swine A(H1N1) virüsünün tanısına yönelik PCR protokollerinin güncellendiğini ve primer prob ve pozitif kontrolleri içeren “Swine İnfluenza PCR Test Kiti” ni ulusal İnfluenza merkezlerine gönderileceğini bildirmiştir.
Kaynaklar:
1- World Health Organization Guidance to Influenza Laboratories Diagnosing Swine Influenza A/H1N1 Infections of current concern, 25 April 2009. (http://www.who.int/csr/disease/swineflu/swineflu_guidance_labs_20090425.pdf )
2- World Health Organization Viral gene sequences to assist update diagnostics for swine influenza A(H1N1), 25 April 2009. (http://www.who.int/csr/disease/swineflu/swineflu_genesequences_20090425.pdf )